Blood Agar Base | بلاد آگار بیس ایبرسکو

Blood Agar Base | بلاد آگار بیس ایبرسکو

دانلود سرتیفیکیت Blood Agar Base | بلاد آگار بیس ایبرسکو

کاربرد: تهیه محیط کشت بلاد آگار و چاکلت آگار برای شناسایی و کشت بسیاری از باکتری های سخت رشد، خصوصا گونه های بیماری زا و نیز بررسی واکنش همولیز آنها

استانداردها , APHA

آزمایش

فرآیند آزمایش

• محیط کشت بلاد آگار را طبق دستور عمل توضیح داده شده تهیه کنید. مقدار ۵٪ خون دفیبرینه گوسفندی  به محیط اضافه کنید.
• نمونه مورد نظر را بر روی پلیت کشت داده و در دمای ۲±۳۵ سانتی گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت گرماگذاری کنید.
• لازم به ذکر است جهت رشد باکتری های استرپتوکوک، محیط های کشت باید در انکوباتور حاوی ۵-۳٪ دی اکسید کربن گرماگذاری شود.

نتیجه و تفسیر

مورفولوژی کلنی باکتری ها بر روی بلاد آگار حاوی ۵٪ خون گوسفندی به شرح زیر می باشد:

• کلنی های باکتری های همولیتیک استرپتوکوک شفاف یا کدر و به رنگ خاکستری بوده که به اندازه های کوچک ( قطر ۱ میلی متر) یا بزرگ و موکوئیدی (۴-۲ میلی متر) دیده می شوند که در اطراف آن ها هاله ای از همولیز تشکیل می شود. رنگ آمیزی گرم بایستی انجام شده و خصوصیات ماکروسکوپی بررسی شود. ( برخی ارگانیسم های دیگر مانند لیستریاها، برخی کورینه باکتری ها، استافیلوکوک های همولیتیک، اشریشیا کلی و سودوموناس نیز واکنش همولیز دارند.
• کلنی باکتری های پنوموکوک معمولا پهن، نرم، شفاف و خاکستری رنگ بوده که در برخی مواقع هاله باریک سبزرنگی از همولیز (همولیز آلفا)، در اطراف کلنی های موکوئیدی آنها دیده می شود.
• استافیلوکوک ها کلنی هایی کدر و به رنگ زرد- طلایی داشته که می تواند همراه یا بدون هاله همولیز بتا باشند.
• باکتری های لیستریا بواسطه ظاهر میکروسکوپی میله ای شکل در رنگ آمیزی و داشتن حرکت در دمای اتاق، شناسایی می شوند. در اطراف کلنی های این باکتری هاله باریکی از بتا همولیز دیده می شود.

نکته

• کلنی های باکتری Haemophilus haemolyticus  بر روی بلاد آگار همراه با خون اسب یا خرگوش، همولیز بتا داشته و برای تشخیص و تمایز آن از استرپتوکوک ها باید از روش دیگری استفاده کرد. برای حل این مشکل، استفاده از خون گوسفندی پیشنهاد می شود زیرا خون گوسفندی فاقد مقادیر کافی نوکلوئوتید های پیریدین بوده و به این دلیل باکتری Haemophilus haemolyticus  بر روی چنین محیطی رشد نمی کند.