• قوطی محیط کشت فلوئید تیوگلیکولات مدیوم را به خوبی تکان دهید. مقدار ۲۹/۸ گرم از پودر محیط را در ۱ لیتر آب مقطر حل کنید.
• به آرامی بجوشانید و هم بزنید تا پودر کاملا حل شود.
• محیط را در حجم­ های ۱۰ میلی­ لیتری داخل لوله­ های آزمایش بریزید.
• در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.

شرایط نگهداری 

پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

آزمایش

فرآیند آزمایش

• نمونه­ مورد بررسی را به داخل محیط وارد کنید. سعی کنید تلقیح در عمق لوله انجام شود.
• برای اطمینان از ایجاد شرایط بی­ هوازی برای کشت، می توان روی سطح محیط در لوله به مقدار ۱ میلی­ لیتر پارافین یا محلول آگار استریل اضافه کرد.
• نمونه کشت شده را تا ۵ روز در دمای ۳۷-۳۵ درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر

کدورت محیط در بخش پایینی لوله نشانه­ رشد باکتری­ های بی­ هوازی است. در قسمت اکسیدشده­ بالای لوله باکتری­ های هوازی اجباری رشد می ­کنند. بی هوازی های اجباری تنها در بخش پایینی لوله که زیر قسمت اکسیدشده واقع شده رشد می کنند.

نکته

• محیط Fluid Thioglycollate Medium را همیشه تازه تهیه و استفاده کنید.
• محیط را در صورتی که بیشتر از یک سوم قسمت بالایی لوله صورتی رنگ باشد استفاده نکنید. در این صورت، محیط را حرارت دهید تا اکسیژن داخل آن خارج شود. اگر پس از حرارت دوباره هنوز بخش زیادی صورتی رنگ بود، از استفاده محیط خودداری کنید.
• محیط را بیشتر از ۱ بار حرارت دوباره ندهید چون منجر به سمی شدن آن می ­شود.
• این امکان وجود دارد که رشد بی­ هوازی­ های اجباری به دلیل رشد سریع بی­ هوازی­ های اختیاری محدود شود. از این رو اگر رشدی مشاهده نشد، باید از تست­ های بیشتر و رنگ ­آمیزی گرم برای بررسی استفاده کرد.

کنترل کیفی

• ظاهر محیط دهیدراته: پودری و یکنواخت
• ظاهر محیط آماده: محلول شفاف و زردرنگ
• نتیجه­ کشت باکتری پس از گرماگذاری در دمای ۳۷-۳۵ درجه سانتی گراد تا ۵ روز